核心词：桂花树 桂花 病毒 苗木 繁育 技术规范 
　　到目前为止,植物病毒病还没有有效的治疗方法,只有培育脱毒苗才能达到预防的目的。
　　1、选择品种纯
　　选择已进入盛果期、观察3年以上、品种纯、生长旺盛、外观无异常的植物作为脱毒材料。嫁接后,应按品种和母株编号记录。将覆盖无菌滤纸的无菌培养皿放在解剖镜台上,用镊子取出上述切下的材料,在解剖镜下用解剖针将外叶原基剥离,将茎尖分生组织切至1.0mm以下（含1~2个叶原基）,并用无菌滤纸将水吸干。酶联免疫吸附试验可检测到带有酶联免疫吸附试验抗血清的桂花病毒。
　　2、每年苗木离开苗圃前应进行病毒检测
　　每年苗木离开苗圃前进行病毒检测,桂花树病毒检测一次,1‰抽样,随机抽样。加强母本苗圃的肥水管理和病虫害防治,确保树木健壮,不早落叶。挖掘苗木前,应当到县、区植物检疫站进行检疫,并申请检疫证明。无病毒母婴园的常用工具应该是专用的。修剪工具（如修剪剪刀）在使用前应使用70%酒精溶液进行消毒。播种前,使用杀菌剂和杀虫剂对土壤进行消毒。外植体接种于MS培养基上,在25℃恒温条件下培养,光照2000～3000lux,光照14h,黑暗10h,诱导丛生芽。木本指示植物检测方法木本指示植物检测方法可检测到李树矮化病毒、李树坏死环斑病毒、桂花小果病毒、桂花绿环斑驳病毒、桂花坏死锈斑病毒和苹果褪绿叶斑病毒。试管苗移栽于温室,成活后进行检测。室内土壤隔离和用网覆盖。可通过病毒检测直接筛选无病毒材料。记录品种和砧木的中文名、外文名、品系和品系;引种单位、来源、时间、病毒消除和检测单位、时间和年度观察记录等。RT-PCR可用于检测李树矮化病毒、李树坏死环斑病毒、桂花小果病毒、桂花绿环斑驳病毒、桂花病毒A、,桂花坏死锈斑病毒和苹果褪绿叶斑病毒。准确记录品种、砧木、原始母株和品系;除毒单位和时间、病毒检测等。美国、加拿大和英国的欧洲桂花都因病毒病损失了30%以上的产量,整个花园严重倒塌。根据编号列出每个雌性父树。各级道路及排灌系统按规划设计,统筹安排。不允许在母婴园嫁接。播种时,按母株编号分别播种,绘制各株系分布图,在田间插入卡片和标记,不得混播。
　　3、种子和其他繁殖材料提供苗圃
　　为桂花的脱毒枝条、种子等繁殖材料提供苗圃。绘制品种、品系分布图,在田间插入卡片和标记,不得混用。将解剖镜放在超净台面上,用浸有消毒酒精的棉球擦拭手和台面,点亮酒精灯,将大小镊子烧灼消毒。扦插繁殖方法:采用绿扦插、硬扦插等方法繁殖脱毒砧木。采用带木质部芽接,嫁接位置距地面10～20cm。收集的接穗应立即在阴凉处剪掉。无病毒原始苗圃内的每棵树应经常在田间进行目视检查,并由国家有资质的病毒检测单位每年进行一次病毒检测。
　　4、应立即用容器将其清除
　　如果发现携带病毒的植物,应立即将其与容器一起移除。接穗的贮藏与普通桂花接穗相同。未携带本标准规定病毒的原始植物由合格的专业机构确定。将盆栽幼苗置于光照强度超过10000勒克斯的人工气候室内,在初始温度32℃下预培养3天。暗温恒定在32℃,白天温度每天增加1℃。当温度达到37℃时,白天保持37℃16小时/天,黑暗中保持32℃8小时/天,湿度保持60%~80%18天。当丛生芽长到1～3cm高时,切取0.3mm以下的茎尖分生组织,接种于MS培养基上诱导丛生芽。原种子保存园距普通果园或苗圃100m以上,建300目纱网室,全园封闭覆盖,出入口设缓冲室。嫁接时,接穗的来源应与原嫁接接穗的来源相同。
　　5、中国从国外引进了大量欧洲桂花品种
　　20世纪80年代以来,中国从国外引进了大量欧洲桂花品种。由于盲目引种,也带来了一些病毒性疾病,严重影响了桂花的生长发育。整个苗圃应封闭并用300目纱网覆盖,与普通果园或苗圃的距离应大于100m。脱毒无性系砧木苗圃的树体应每年缩短更新,方法与普通无性系砧木母株相同。根据品种进行捆扎,并标记母株编号。由于果树的长期营养繁殖,各种病毒病不断蔓延并日趋严重,导致果树生长不良、产量下降、品质劣化和树体异常,给生产带来巨大的经济损失。在洗涤剂中浸泡3分钟后,用自来水冲洗10分钟,转移到超净工作台,在70%酒精中浸泡6秒钟,用2%次氯酸钠消毒10~20分钟,用无菌水冲洗3次。该编号包括品种名称、原始苗圃的母株系号和该植物的编号。从接穗上采集的枝条生长良好,花蕾饱满,没有早期落叶和病害。与普通桂花幼苗相同。无李矮病毒、李坏死环斑病毒、桂花小果病毒、桂花绿环斑点病毒、桂花病毒A、桂花坏死锈斑病毒和苹果褪绿叶斑病毒的桂花幼苗。按品种成排种植。把同一品种种在一起。种植后,绘制种植图并进行标记。不得混合。繁殖方法:砧木自根苗从脱毒母本苗圃直接分层分株繁殖,在苗圃种植后埋入干层繁殖脱毒砧木。应充分挖掘幼苗的主根,以尽量减少对根和幼苗茎的伤害。凡是不注日期的引用文件,其最新版本（包括所有修改件）适用于本文件。进入无病毒原始苗圃前,员工应更换工作服。
　　6、梅花坏死环斑病毒侵染桂花可显著降低果园产量25%～50%
　　李坏死环斑病毒感染欧洲桂花可显著降低果园产量25%～50%,部分品系可降低产量50%以上。
　　7、产量将进一步下降
　　如果有两种以上的病毒感染欧洲桂花,产量下降幅度将更大。选择增殖能力强的无性系传代4~5代。有关热处理方法,请参阅。经过18天的变温处理后,剥去0.4毫米茎尖进行组织培养、继代培养和繁殖,并进行试验。如果检测到病毒,则根据编号跟踪病毒并检测其母树。本标准定义了《桂花脱毒育苗技术规范》的术语和定义,规定了建立桂花脱毒原始苗圃和母本苗圃、脱毒育苗、病毒检测和监测的方法,出苗、储运等。脱毒原苗圃的常用工具应专用,剪枝剪等修剪工具使用前用70%酒精溶液消毒。其他管理与普通苗圃相同。
　　8、在生长季节每年对脱毒苗进行两次综合观察
　　观察:在生长季节每年对脱毒苗进行两次综合观察。如果发现病毒症状,立即清除带病毒植物和相邻植物。土壤结冰时不要挖秧苗。苗圃距离普通果园、苗圃3000米以上,或整个苗圃封闭,覆盖100目防虫网,距离普通果园、苗圃50米以上。苗木挖好后,应及时进行分级、捆扎。规划苗木播种区、无性系砧木繁育区和成苗培育区。采种后,应标记母株编号,并立即存放在沙地中,以便秋季或早春播种。自中国开展桂花病毒病研究以来,已发现并报告了7种病毒,
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