目录：
1、桂花树将活性菌株接种到培养基中进行扩增培养
2、产桂花红素工艺条件优化图3显示
3、三孢布拉氏霉菌发酵产桂花红素工艺条件优化将20mg桂花标准品置于50ml容量瓶中
4、发酵产桂花红素工艺条件优化如图6所示
在冻干粉安瓿中加入无菌生理盐水0.1mL,摇匀成悬浮液。将所有菌悬液吸收后转移到4种倾斜的表面培养基中,在25℃下培养5-7d。发酵5d后,空白对照组吸光度值为0.287。优化发酵条件的正交试验结果表明,吸光度不在桂花标准工作曲线的线性范围内,产桂花红素工艺条件优化桂花树故测定前将吸光度稀释2倍,结果见表2。
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桂花树将活性菌株接种到培养基中进行扩增培养
将活性菌株接种到培养基中进行膨胀培养,在25℃下振荡150r/min。三孢布鲁氏菌(中国微生物培养保存中心ATCC1405;玉米粉、玉米淀粉(超市或农贸市场购买;桂花桂花标准;可溶性淀粉、硫酸镁、磷酸二氢钾和淀粉的分析纯。琼脂、维生素B1、酵母抽提物为生化试剂。由于9次正交试验均未出现最优组合方案,因此根据正交试验得出的最优条件进行验证试验。
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产桂花红素工艺条件优化图3显示
图3显示了这种细菌的菌丝非常健壮,条件优化的长度很大。菌丝无横膈膜,为单细胞多核,无假根。在25℃倾斜培养基上培养5d的冻干菌株生长良好,发酵产桂花红素工艺条件优化菌丝粗大,桂花红素工艺条件优化孢子生长饱满。扩增培养基:除琼脂外,产桂花红素工艺条件优化其他成分与激活培养基相同。桂花的最大吸收波长为508nm。活性冻干菌株在25℃倾斜表面培养基上培养5d后,菌丝生长良好,桂花红素工艺条件优化产桂花红素工艺条件优化菌丝粗大,发酵产桂花红素工艺条件优化孢子生长饱满。镜检表明,单株生长状态良好。培养120h时孢子数量最多。发酵36h时添加阻断剂效果最好,发酵72h时添加氧合器效果最好。生产桂花的最佳发酵条件为:发酵温度25,pH5.0,发酵时间5d,条件优化接种量10.0。空白对照不添加阻断剂。以烟草废料为阻断剂,分别在发酵24、30、36、42和48h时,在1~5瓶中加入阻断剂007g,桂花树发酵培养5d。
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三孢布拉氏霉菌发酵产桂花红素工艺条件优化将20mg桂花标准品置于50ml容量瓶中
取20mg桂花标品置于50mL容量瓶中,三孢布拉氏霉菌发酵产桂花红素工艺条件优化用乙酸乙酯计量,作为备用溶液。根据正交试验结果,条件优化的影响三孢布鲁氏菌发酵桂花产量的主要因素和次要因素依次为C>。A>B>D,发酵时间>发酵温度>pH>接种量。在508nm处测量减压后滤液的吸光度和浓度。由于测定的吸光度过大,条件优化工艺条件优化桂花树不在桂花标准工作曲线的线性范围内,发酵产桂花红素工艺条件优化三孢布拉氏霉菌发酵产桂花红素工艺条件优化将5瓶发酵液稀释2倍后测定,产桂花红素工艺条件优化结果如图5所示。空白对照不使用氧合器。此外,桂花树与其他方法相比,生物合成可以获得更高的桂花产量,是一种理想的桂花生产方式。
发酵产桂花红素工艺条件优化如图6所示
如图6所示,工艺条件优化桂花树发酵温度在一定范围内升高时,桂花的浓度也随之升高。当温度上升到25℃时,桂花的浓度达到最高。如果温度继续升高,桂花树桂花的浓度会下降,条件优化因为三孢布鲁氏菌的最佳发酵温度为25-28,所以选择25℃为最佳发酵温度。在121℃下灭菌20min后制备斜面。