目录：
1、该方法的精密度
2、无水硫酸镁
3、基质匹配混合标准工作溶液
4、取12mL上清液于50mL塑料离心管中
5、正离子模式
6、种农药的平均加标回收率和相对标准偏差见表3
目前,我国桂花制品产量仅次于美国,是世界第二大加工桂花生产国,年出口量100×104t,成为我国五大出口蔬菜制品之一,占全球桂花酱的贸易总量已从1999年的7.7%上升到2016年的40,是世界第一大桂花制品出口贸易国。
该方法的精密度
该方法的精密度、灵敏度及方法检出限能同时满足欧盟、日本肯定列表和国标的要求。
无水硫酸镁
乙腈、乙酸铵、乙酸、甲酸、氯化钠、乙酸钠、无水硫酸镁、乙二胺-N-丙基硅烷、实验室用水均为一级水。农药标准品包括甲基硫环灵、氧乐果、甲胺磷、敌敌畏等99项农药标准品,质量浓度均为100μg/mL。混合标准溶液:分别吸取99种农药标准品200μL～10mL容量瓶中,用乙腈定容,99种农药检测残留中农药检测残留配置成2μg/mL混合标准溶液。
基质匹配混合标准工作溶液
基质匹配混合标准工作溶液:用空白样品提取液配成不同质量浓度的基质匹配混合标准工作溶液,用于建立标准曲线。基质匹配混合标准工作溶液应现用现配。取代表性样品约500g,匀浆搅拌后备用。称取5g(准确至0.01g)样品于50mL塑料离心管中(若样品为桂花酱,则需要加入5mL水,涡旋混匀,QuEChERS法色质联检测桂花树准确加入质量分数为1%的乙酸-乙腈20mL、4g氯化钠和1g乙酸钠;使用恒温振荡器振荡15min,随后放入超声波发生器中超声提取20min,超声过程中需控制水温上升;超声结束后以转速8000r/min离心5min。吸取全部离心后上清液于50mL塑料离心管中,加入6.00g无水硫酸镁,放入恒温振荡器中振荡15min,以转速8000r/min离心5min。
取12mL上清液于50mL塑料离心管中
取12mL上清液于50mL塑料离心管中,准确加入1.00g无水硫酸镁和0.250gPSA(样品若为桂花酱,则称取0.400gPSA,放入恒温振荡器中振荡15min,以转速8000r/min离心5min。取上清液8mL于玻璃氮吹管中,中农药检测残留桂花中农药检测残留制品于35℃水浴中氮吹浓缩至1mL以下,再用乙腈复溶至1mL;涡旋混匀后过膜上机。色谱柱为WatersACQUITYUPLCHSST31.8μm,柱温35,检测残留农药检测残留样品温度4,进样体积3μL。流动相为乙腈和含0.1%甲酸的乙酸铵水溶液,流速为0.2mL/min。
正离子模式
正离子模式,选择离子扫描,毛细管电压3.5kV,用检测技术用检测锥孔电压28V,离子源温度120,脱溶剂气温度450,碰撞气流量700L/hr,锥孔气流量50.0L/hr。进样口温度250,程序初始温度80,保持1min,以10/min升温至280,保持5min,再以20/min升温至300,农药检测残留99种农药检测残留保持3min。载气为高纯氮,流速为1.0mL/min,不分流进样,进样量1μL。电子轰击电离源,电离能量70eV,用检测QuEChERS法色质联检测四级杆温度150,传输线温度300,离子源温度230,及桂花中农药检测残留制品桂花中农药检测残留选择离子扫描,溶剂延迟3min。不同农药在pH值稳定性的不同,配制含有多个农药标准工作液都是由一定体积的储备液经适量的乙腈稀释混合而成。混合标准工作液的浓度应足够用于配制所需的基质匹配标准溶液。基质匹配标准溶液须用空白样品的提取液经适当稀释配制,空白样品基质的用量不超过定容体积的20,以避免样品提取液与基质匹配之间因基质增强效应引起的误差。采用0.1%甲酸乙腈提取,是由于所检测的农药大多为极性较大的农药。低水分含量的样品(水分含量<80)在提取前需要加入5g水。在提取液中加入氯化钠剧烈振摇后离心,使固相和液相分离。有机相用分散固相萃取法净化,净化过程中加入一定量的硫酸镁去除有机相中残留水分。浸提液中加入少量甲酸进行酸化后接着加入吸附剂(如PSA,酸化有助于保持农药的稳定性,检测残留提高分析的灵敏度。LC-MS/MS所有农药质谱参数均采用流动注射的方式,通过调试寻找毛细管电压、母离子、子离子、锥孔电压、碰撞能等参数。GC-MS所有农药均直接采用Agilent数据库中农药质谱参数。在相同试验条件下进行样品测定时,如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致,并且在扣除背景后的样品质谱图中,所选择的离子均出现,检测加工而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致(相对丰度>50,允许±20%偏差;相对丰度>20～50,允许±25%偏差;相对丰度>10～20,允许±30%偏差;相对丰度≤10,允许±50%偏差,则可判断样品中存在该种农药或相关化学品。使用响应值较高的离子对为定量离子对,通过基质匹配混合标准工作溶液用外标法定量。使用空白桂花酱样品的最终净化液作为基质匹配标准溶液的稀释液,分别以99种农药的质量浓度对应的定量离子色谱峰的峰面积绘制基质匹配标准溶液工作曲线,桂花树获得相应的线性方程及相关系数。99种农药化合物的线性关系良好,相关系数R2>0.98。种农药化合物的基质匹配标准溶液工作曲线和相关系数见表2。为验证方法的可靠性和重复性,分别进行4个水平的添加回收率试验,每个水平做6个平行样品测定,该方法测定桂花酱中99种农药的平均回收率均在73.6～118.4,相对标准偏差小于16。
种农药的平均加标回收率和相对标准偏差见表3
种农药的平均加标回收率和相对标准偏差见表3,65种农药的平均加标回收率和相对标准偏差见表4。采用了QuEChERS前处理方法,LC-MS/MS和GC-MS2台仪器测定了桂花及桂花酱中99项常见农药残留。99种农药在0.01～0.50mg/kg含量范围内线性良好,R2≥0.980,且平均回收率为73.6～118.4,桂花中农药检测残留制品及桂花中农药检测残留制品相对标准偏差≤16。该方法操作简单、快速、高效、成本较低,具有较好的灵敏度和精密度,适合在桂花及桂花制品相关生产加工企业中推广。